Cuestionario Hplc 4s6k5i

CUESTIONARIO HPLC

1- En qué año fue desarrollada la técnica de HPLC? 1903 2- Cuáles son las principales aplicaciones? Parte bioquímica y analítica para separar, identificar y cuantificar compuestos de una mezcla. 3- Cuál es la principal diferencia entre la cromatografía de gases y la cromatografía líquida de alta eficiencia? Utiliza alta presión y muestras no volátiles muestras no deben ser vaporizadas. 4- Nombre los compuestos que pueden ser analizados por medio de la cromatografía líquida. Determinar aminoácidos, proteínas, ácidos nucleicos, esteroides, drogas, plaguicidas, antibióticos, especies organometalicas y ciertas sustancias de carácter inorgánico. 5- Ventajas de la técnica. Altamente sensible, más rápida en la respuesta de los compuestos y es mucho más versátil. 6- Partes del equipo.  Sistema cromatográfico  Reservorios  Bombas  Sistema de inyección  Columna  Sistema de detección  Registrados de datos 7- Cuál es la función de la bomba? Generan una alta presión del gas para que el líquido eluya y pasa a través de las columnas cromatografías. 8- Explique los diferentes tipos de inyección que existen para HPLC.  Automáticos: Utilizan una jeringa que no tiene punta, emplea de 1 a 10 uL de muestra y se ubica entre la bomba y la columna.  Manual: Mediante válvulas lup de flujo constantes que inyectan una determinada cantidad en la columna. 9- Cuál es el rango de temperatura en el que puede trabajar la columna en HPLC. 20 °C

10-Describa las columnas para HPLC. Material, tamaño.

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Material acero inoxidable o plástico Longitud de 5 a 30 cm Dentro se encuentran fase estacionaria con partículas de sílice o carbón activo Diámetro de 1 a 5 mm

11-Cuál es la función de la precolumna? Y qué tipo de fase estacionaria debe tener. En la precolumna se quedan todas las partículas o suciedades que puedan dañar a la columna, la fase estacionaria debe ser la misma en la columna y precolumna. 12-Que preparación se le debe dar a la muestra? Deben ser filtradas que tienen un diámetro de 1 a 5 um 13-Nombre los diferentes tipos de detectores y cuál es la aplicación de cada uno.  Detector del índice de refracción: Trabaja con modo isocrático  Detector de fluorescencia: Analitos fluoresecntes por naturaleza  Detector de arreglo de fotodiodos: Utiliza lámparas de deuterio, xenón, wolframio y un monocromador.  Detector del espectrómetro de masas: Cuantificar los compuestos en una muestra 14-Que es modo isocrático La fase móvil es constante en el tiempo o utiliza un solo disolvente al inyectar la muestra 15-Que es modo gradiente Fase móvil varia con el tiempo, utiliza una mezcla de solventes para trabajar las muestras 16-Explique el proceso completo de análisis por HPLC. a) La muestra es colocada en un vial ámbar y disuelta en los disolventes orgánicos b) La muestra es colocada en el automuestradeor. c) El sistema de inyección toma 10 uL de muestra y los inyecta en la columna. d) En la columna se separan los compuestos y luego pasan a ser cuantificados en un detector. e) La respuesta de los detectores es un cromatograma que nos indica el numero de compuestos que tiene la muestra, cada pico significa un compuesto diferente.

Cromatografía de líquidos de alta eficiencia. (2013). Retrieved from https://www.youtube.com/watch? v=zVC_BttoOKE&feature=youtube_gdata_player